潔凈廠房的沉降菌標(biāo)準(zhǔn)原理：采用沉降法，即通過于培養(yǎng)皿中利用自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子，經(jīng)不少于48小時(shí)的培養(yǎng)，在30—35℃下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室(區(qū))的潔凈度。

　　潔凈廠房沉降菌標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容：

　　1. 器材：

　　高壓消毒鍋：使用時(shí)嚴(yán)格按照說明書操作。

　　恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計(jì)進(jìn)行檢定。

　　培養(yǎng)皿：Φ90mm玻璃培養(yǎng)皿

　　培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂

　　2. 操作程序

　　2.1 采樣

　　將已制備好的培養(yǎng)平皿按要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時(shí)，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。

　　2.2 培養(yǎng)：

　　2.2.1 全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　2.2.2 在30~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48小時(shí)。

　　2.2.3 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照實(shí)驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染。可每批選定3只培養(yǎng)皿做對照實(shí)驗(yàn)。

　　2.3 菌落記數(shù)

　　2.3.1用肉眼直接計(jì)數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5~10倍放大鏡檢查，是否有遺漏。

　　2.3.2 若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。

　　2.4 注意事項(xiàng)

　　2.4.1 測試用具要做滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。

　　2.4.2 采取一切措施防止人為對樣本的污染。

　　2.4.3 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)做詳細(xì)的記錄。

　　2.4.4 由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。

　　2.4.5 采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。

　　3. 測試規(guī)則

　　3.1 測試狀態(tài)

　　3.1.1 沉降菌測試前，被測試潔凈室(區(qū))的溫濕度須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。

　　3.1.2 沉降菌測試前，被測試潔凈室(區(qū))已經(jīng)過消毒。

　　4.1.3 測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)要求，并在報(bào)告中注明測試狀態(tài)。

　　3.2 測試人員

　　3.2.1 測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈級別的工作服。

　　3.2.2 靜態(tài)測試時(shí)，室內(nèi)測試人員不得多于二人。

　　3.3 測試時(shí)間

　　3.3.1 對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10分鐘后開始。

　　3.3.2 對非單向流，如10,000級，100,000級以上的凈化房間，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30分鐘后開始。

　　3.4 沉降菌計(jì)數(shù)

　　3.4.1 采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置

　　潔凈廠房沉降菌測試的最少采樣點(diǎn)數(shù)目可查表1確定。在滿足最少測點(diǎn)數(shù)的同時(shí)，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)。

　　3.5.2 采樣點(diǎn)的位置

　　3.5.2.1工作區(qū)采樣點(diǎn)的位置離地0.8~1.5m左右(略高于工作面)。

　　3.5.2.2 可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加采樣點(diǎn)。

　　3.6 記錄：測試報(bào)告中應(yīng)記錄房間溫度、相對濕度及測試狀態(tài)。

　　3.7 結(jié)果計(jì)算

　　3.7.1 用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù).

　　3.7.2平均菌落數(shù)的計(jì)算：

　　平均菌落數(shù)=(M1+M2+…Mn)/n

　　式中： M1 — 1號培養(yǎng)皿菌落數(shù)

　　M2 — 2號培養(yǎng)皿菌落數(shù)

　　Mn — n號培養(yǎng)皿菌落數(shù)

　　n — 培養(yǎng)皿總數(shù)。

　　3.8 結(jié)果判定

　　潔凈廠房的沉降菌標(biāo)準(zhǔn)用平均菌落數(shù)判斷潔凈室(區(qū))空氣中的微生物數(shù)。

　　3.8.1潔凈室(區(qū))內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標(biāo)準(zhǔn)。

　　3.8.2若某潔凈室(區(qū))內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對此區(qū)域先進(jìn)行消毒，然后重新采樣兩次，測試結(jié)果均需合格。

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